台盼蓝检测细胞活性细胞活性检测-台盼蓝染色法 台盼蓝染色法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方法检测细胞存活率的一种快速简便的方法。 【应用简介】 台盼蓝染色法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方法检测细胞存活率的一种快速简便的方法。 【实验原理】 台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。 【实验方法】 1. 将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同); 2. 细胞悬液加新鲜配制的台盼蓝染液,室温下染 3—5 min; 3. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察; 4. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。活细胞不着色并保持正常形态,有光泽; 5. 计数活细胞和死细胞数目; 6. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。 (细胞活率 = 未染色的细胞数/观察的细胞总数×100%) 【注意事项】 1. 此方法可以用于胞质胞核分离实验中,检测细胞是否充分裂解。 2. 台盼蓝染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染上颜色,使监测结果偏低。 3. 另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。 4. 台盼蓝有潜在致癌危险,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |