流式细胞分选流式细胞分选 流式细胞分选是把一种细胞从多细胞样品中分离出来。用抗体标记细胞，同时被用的抗体被萤光标记或连接免疫磁珠或其它，利用萤光和免疫磁珠的特性来分离细胞。 细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口.上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。 【应用简介】 流式细胞分选是把一种细胞从多细胞样品中分离出来。用抗体标记细胞，同时被用的抗体被萤光标记或连接免疫磁珠或其它，利用萤光和免疫磁珠的特性来分离细胞。 细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口.上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。 【实验原理】 当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入样品管中，被高压压入流动室内。流动室内充满鞘液，在鞘液的包裹和推动下，细胞被排成单列，以一定速度从流动室喷口喷出。在流动室的喷口上配有一个超高频的压电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正、负不同的电荷，当液滴流经过带有几千伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，没有充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。 流式细胞分选，它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现单克隆分选，能复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离，单次可同时对其中一种到四种特定细胞进行超高速分选纯化、高通量单克隆分选或细胞芯片制备。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等，可进一步进行细胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同细胞之间的差异化研究。硬件中样本细胞丢弃的比例低于5%，保证样本中目标细胞的高回收率。 【应用范围】 1、利用流式细胞分选技术分选肿瘤干细胞 肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新.无限增殖及多向分化潜能的细胞，这部分细胞虽然只占少部分，但在肿瘤的发生.演进、复发耐药及逃逸免疫系统的识别和清除过程中可能发挥了至关重要的作用。 2、利用流式细胞分选技术分选外周血细胞 基于流式细胞仪的分选功能，根据细胞的大小以及颗粒度等特征，对白细胞直接进行分选获取人外周血中的单核细胞的方法，既避免了多次重复离心，又能分选得到纯度在80%-90%之间的单核细胞用于后续实验，为深人研究单核细胞提供了良好的技术平台。 3、利用流式细胞分选技术分选染色体 通过流式分选的方法得到高质量的单个染色体，该方法可同时纯化大量染色体,为后续试验，如植物基因组测序等提供了方便。 4、利用流式细胞分选技术分选造血干细胞 通过配制HSCs体外培养液并结合流式细胞分选技术，建立了一种在体外不需要基质细胞支持的,稳定的，高通量培养单个HSC形成-个血细胞集落的实验方法。 5、利用流式细胞分选技术分选神经细胞 建立了一种较为完善的流式细胞仪分选在体模型中神经细胞的技术方法，该分选方法可以同时获得纯度高、数量多的不同种类的神经细胞。STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列）是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA 串联重复序列，其核心序列重复次数存在个体差异多态性，因此STR也被称为细胞的DNA指纹。 |
