淋巴细胞亚群检测淋巴细胞亚群检测 在流式细胞术中，测定某细胞群体或者亚群的比例是最简单、最基本的应用，对血液病、肿瘤、免疫性疾病如自身免疫病、免疫缺陷病的诊治，器官移植排斥反应的监测和免疫系统功能如淋巴细胞活化研究等有重要价值。细胞在各自正常分化成熟的不同阶段以及活化过程中，其细胞膜表面均可表达可供鉴别的特殊结构，即表面标志。利用荧光素标记的单克隆抗体作为分子探针，可对这些细胞表面标志进行流式细胞术的检测，进而对细胞 的种类、亚型以及功能特征进行分析。 【应用简介】 在流式细胞术中，测定某细胞群体或者亚群的比例是最简单、最基本的应用，对血液病、肿瘤、免疫性疾病如自身免疫病、免疫缺陷病的诊治，器官移植排斥反应的监测和免疫系统功能如淋巴细胞活化研究等有重要价值。细胞在各自正常分化成熟的不同阶段以及活化过程中，其细胞膜表面均可表达可供鉴别的特殊结构，即表面标志。利用荧光素标记的单克隆抗体作为分子探针，可对这些细胞表面标志进行流式细胞术的检测，进而对细胞 的种类、亚型以及功能特征进行分析。 流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体，与待测成分作用，然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列，一个个迅速通过激光聚焦区，激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号，利用这些信号，可计算出相对含量，从而得到细胞群的相对比值。 【实验原理】 流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体，与待测成分作用，然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列，一个个迅速通过激光聚焦区，激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号，利用这些信号，可计算出相对含量，从而得到细胞群的相对比值。 利用不同荧光物质标记的抗CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56单克隆抗体，与待测成分作用，然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列，一个个迅速通过激光聚焦区，激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号，利用这些信号，可计算出CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+、CD56+的相对含量，从而得到各细胞群的相对比值技术。 淋巴细胞是正常机体免疫系统功能 重要的一大细胞群，在免疫应答过程中，淋巴细胞发育成为功能不同的亚群。各亚群的数量和功能产生异常时，就能导致机体免疫紊乱并产生病理变化。淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它总体反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等），分析发病机制，观察疗效及检测预后有重要意义。利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，再配合多色荧光染料，通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的相对比例。 我们的常用检测指标为 T淋巴细胞：CD3+CD4+CD8+ B淋巴细胞：CD3-CD19+ NK细胞：CD3-CD16+CD56 【实验方法】 Step1：制成单细胞悬液（组织样本） Step2：溶血（细胞样本无需进行此步骤） Step3：离心去上清 Step4：调整细胞密度 Step5：加入相应的标记抗体 Step6：孵育 Step7：洗涤后离心去上清 Step8：上机检测 【注意事项】 1、新鲜全血应尽快送检，长时间保存应放置在4-8℃； 2、使用抗凝管采集，一般 管为EDTA与肝素抗凝管； 3、抗凝血应保证无血块凝集。STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列）是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA 串联重复序列，其核心序列重复次数存在个体差异多态性，因此STR也被称为细胞的DNA指纹。
[送检与交付标准] |
