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Treg、Tfh、Tfr、TR-35检测

Treg、Tfh、Tfr、TR-35检测

Treg/Tfh/Tfr/iTR-35检测,我们常用的检测指标:CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。

【应用简介】

Treg/Tfh/Tfr/iTR-35检测,我们常用的检测指标:CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。

【实验原理】

流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体,与待测成分作用,然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列,一个个迅速通过激光聚焦区,激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号,利用这些信号,可计算出相对含量,从而得到细胞群的相对比值。

调节性T细胞(Tregs)是免疫系统中的必需细胞,可抑制其他细胞的免疫反应,旨在限制过度反应并防止自身免疫。Tregs以CD4,CD25和Foxp3的表达为特征,而缺少CD127。CD4 + Foxp3 +调节性T细胞已被称为“天然存在”的调节性T细胞,以将其与体外产生的“抑制性” T细胞群体区分开。

辅助性T细胞(Follicular helper T cells,Tfh细胞)为生发中心产生亲和力成熟的B细胞提供了必不可少的帮助。通过许多标准,它们可与其他T辅助细胞类型区分开,包括转录因子BCL-6和CXCR5的表达,CXCL13的受体将Tfh细胞募集到卵泡。它们的功能也是独特的,因为它们通过产生IL-21(一种辅助细胞因子,可有效刺激B细胞分化为抗体形成细胞)来提供与Th2细胞不同的B细胞帮助。

滤泡调节性T细胞(Follicular regulatory T cells,Tfr细胞)在分化早期,细胞因子受体及其它共刺激/共抑制信号协同启动了Treg细胞向Tfr细胞的分化信号,此信号的集合最终诱导Treg表达转录因子Bcl-6及趋化因子受体CXCR5,分化为早期Tfr细胞。

白细胞介素35 (interleukin-35,IL-35)为IL-12家族的新成员,是由p35和Ebi3以共价键相结合形成的异源二聚体,主要通过抑制Thl7细胞分化和促进调节性T(Treg)细胞增殖在多种疾病的免疫调控中发挥免疫抑制作用。iTr35细胞为IL-35诱导产生的一种新型诱导性Treg细胞亚群,具有长期的功能稳定性.因此,iTr35细胞和IL-35在免疫调控中具有重要作用。

我们常用的检测指标:CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。

【实验流程】

组织:制成单细胞悬液-溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的标记抗体-孵育-离心去上清-上机

血液:溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的表面标记抗体-孵育-离心去上清-上机

[送检与交付标准]

样品类型

样品需求

运输条件

组织

离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内

常温运输

活细胞

样本量:1×106个细胞/TEST,加入PBS培养基内

常温运输

血液

将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝管内

常温运输



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