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甲苯胺蓝染色

甲苯胺蓝染色

甲苯胺蓝染色实验外包,一站式生物医学科研服务外包平台,真实实验服务外包找普拉特泽生物。

【应用简介】

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【实验原理】

甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。。

【染色步骤】

   (1)脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5分钟,二甲苯Ⅱ5分钟,二甲苯Ⅲ5分钟,无水乙醇1分钟,95%乙醇1分钟,75%乙醇1分钟,自来水冲洗数秒。

   (2)滴加甲苯胺蓝染色液染色20-30分钟。

   (3)流水稍洗,洗去多余染色液。

   (495%乙醇分色,在镜下控制分色效果。

   (5)脱水透明:无水乙醇1分钟,二甲苯3次,每次1-2分钟,中性树胶封固。

   (6)染色结果:软骨和成骨细胞呈蓝紫色,背景呈淡蓝色。



【常见问题】

1、染色时间过长或过短导致的染色过深或过浅。

2、植物组织较脆,易出现掉片。

【注意事项】

1、控制染色时间,保证染色不至于过深或过浅,必要时可在显微镜下观察控制染色时间。

2、水洗时间不易过长,保证阳性显色清晰可见。

3、植物组织切片时应控制切片厚度以及摊片时间,减少掉片风险。

[送检与交付标准]

[交付标准]

1.实验报告

2.真实实验结果

3.原始图片

4.实验原始数据

5.剩余物料在周期内可返还(超过周期,不予返还)

[送检标准]


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