单克隆抗体制备单克隆抗体(Monoclonal Antibodies,简称mAb)是一种由单一的B淋巴细胞克隆所产生的抗体。与传统的多克隆抗体相比,单克隆抗体具有高度的特异性和亲和力,因此在诊断和治疗领域具有广泛应用前景。 制备过程: 单克隆抗体的制备主要分为三个步骤: 1.免疫原的选择和制备; 2. 混合和筛选; 3. 克隆和扩增。 第一步骤中,需要选择适宜的免疫原。一般情况下,免疫原可由蛋白质、肽或药物等构成。免疫原通常会注射到小鼠或其他哺乳动物中,以激发其免疫反应产生抗体。 第二步骤中,需要从免疫动物的脾脏或其他淋巴组织中获取B淋巴细胞,然后将其与肿瘤细胞融合生成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞具有不断分裂并维持特异性抗体合成的能力。 第三步骤中,需要从杂交瘤细胞群体中筛选并挑选出产生目标单克隆抗体的正常杂交瘤细胞,并将其扩增。 单克隆抗体的优势和局限性 1.单克隆抗体的优点 (1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。 (2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。 (3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。 (4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。 2.单克隆抗体的局限性 (1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。 (2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。 (3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高 。 上一篇Western Blot
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