常见问题 | 建议 |
细胞划痕实验是否可以用其他实验替代 | 不建议，因为细胞划痕实验是观察细胞迁移活动的重要技术手段，而且简单快捷、经济实惠。细胞迁移参与到很多的如免疫、炎症、肿瘤转移、损伤修复、胚胎发育等生理和病理的活动中，有重要的临床研究意义。 |
细胞划痕实验都是6孔板，是否可以用12或24孔板 | 虽然12或者24孔板的也可以用，但更适合高通量初筛时，而6孔板大小适中，可保证有相当距离的平直划痕，便于观察。 |
怎样避免细胞增殖对细胞迁移实验造成的假阳性 | ①需要使用无血清或低血清培养基(<2%)可使其细胞增殖减少结果的影响因素； ②实验的通用时间是24h为细胞的一个周期，在选取合适的时间点(6，12，24h)检测划痕宽度时，控制的时间要在一个周期内； ③不考虑其他，只考虑细胞迁移，可以先用丝裂霉素(1ug/ml)处理1h，抑制细胞的分裂。 |
如何拍好结果照片 | 先按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，划痕一次与5条定位线相交，就会有10个可固定监测点，就不会出现前后观察位置时不固定的现象 |
得出结果的细胞不迁移 | 首先需要避开细胞状态的影响，再考虑细胞自身的迁移能力，并非所有细胞都适合划痕实验，我们以乳腺癌为例子，乳腺癌细胞MCF-7几乎很难迁移，相对而言MDA-MB-231具有很强的迁移性。 |
细胞划痕实验需要避免的细胞 | ①生长特别缓慢的细胞（如：内皮细胞）；②贴壁不牢的细胞（如：神经母细胞瘤）；③堆积生长或长不满的细胞（如：巨噬细胞）。 |
其他注意事项 | ①确保培养板内细胞为单细胞层。 ②划痕时注意保持划痕区域边缘的平整。 ③划痕时保持不同分组间划痕区域距离的一致性。 ④不同细胞的迁移速率不同 |
