(以肿瘤细胞为例)
常见问题
建议
为什么取得原代肿瘤组织,分离的却不是肿瘤细胞
取材时,首先要熟悉所需组织的类型和部位特征,选择肿瘤细胞集中、活力较好的部分。避免结缔等正常组织。
如何去除细胞中混成纤维细胞
由于成纤维细胞贴壁速度较肿瘤细胞快,可利用反复贴壁法使二者分离,进而达到清除成纤维细胞的目的。
离心后,没有细胞分离出来
需要考虑消化酶的因素,由于肿瘤组织较致密,胰酶无法消化,一般选用胶原酶,如胶原酶Ⅳ。若是组织十分致密可以再结合机械法,如研磨或者搅拌加速细胞分散。
胶原酶和胰酶的区别
胶原酶
胰酶
来源
细菌
软组织
消化组织
纤维多的硬组织
对细胞影响
伤害小
长时间有损伤
作用力度
强