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原代细胞分离常见问题

(以肿瘤细胞为例)

常见问题

建议

为什么取得原代肿瘤组织,分离的却不是肿瘤细胞

取材时,首先要熟悉所需组织的类型和部位特征,选择肿瘤细胞集中、活力较好的部分。避免结缔等正常组织。

如何去除细胞中混成纤维细胞

由于成纤维细胞贴壁速度较肿瘤细胞快,可利用反复贴壁法使二者分离,进而达到清除成纤维细胞的目的。

离心后,没有细胞分离出来

需要考虑消化酶的因素,由于肿瘤组织较致密,胰酶无法消化,一般选用胶原酶,如胶原酶Ⅳ。若是组织十分致密可以再结合机械法,如研磨或者搅拌加速细胞分散。


胶原酶和胰酶的区别


胶原酶

胰酶

来源

细菌

软组织

消化组织

纤维多的硬组织

软组织

对细胞影响

伤害小

长时间有损伤

作用力度

伤害小


初源云医疗
初源云医疗专注于医学科研版块,业务涵盖细胞基因修饰、病毒包装、合成生物学、单细胞测序、蛋白质组学、基因编辑动物、药品上市后药效研究等科研技术服务和成果转化。 基石启航医疗与香港基石生物、探罕科学研究有限公司、松诺生物及香港科技大学、沈阳医学院等国内外知名机构有着深度合作关系,旨在促进资源共享和技术交流,加速研究成果的转化和应用
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