小动物活体成像技术01.简介 小动物活体成像技术是指应用影像学方法,对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究,其基本原理是光可以穿透实验动物的组织并且可由仪器量化检测到光强度,同时反映出细胞的数量。常用于皮下移植瘤、原位移植瘤和尾静脉注射转移瘤等模型中。 表1常见的几种小动物活体成像技术优缺点 生物发光成像实验 实验步骤: 1.用荧光素酶基因标记肿瘤细胞等。 2.筛选阳性克隆、绘制标记物的发光梯度曲线等。 3.选择转染率相对高且稳定的一批细胞进行体内实验。 4.麻醉实验动物。 5.注射底物荧光素。最佳的检测时间是在注射后10到15分钟之间。(对于不同的动物模型,发光动力学过程并不完全一致,最好先进行预实验确定何时发光信号最强) 6.成像。 结果呈现: 1.皮下移植瘤模型: 2.原位移植瘤模型: 3.尾静脉注射移植瘤模型: 荧光成像实验 实验步骤: 1.用荧光报告基团(GFP、RFP、Cy5、Cy7等)进行标记(注射入小鼠体内)。 2.小鼠经过麻醉后放入成像暗箱平台,照明灯拍摄第一次背景。 3.照明灯自动关闭,动物成像。 常用荧光染料:DIR、DID、CY5、CY5.5 结果呈现: 脾脏包膜肝转移模型: |